遗传毒性试验-中科检测

遗传毒性试验是采用哺乳动物或非哺乳动物细胞、细菌、酵母菌、真菌或整体动物测定试验样品是否会引起基因突变、染色体结构畸变以及其他DNA或基因变化的试验。遗传毒性试验的主要目的是研究医疗产品导致人体基因改变，并能通过生殖细胞传递至下一代的潜力。

遗传毒性试验用于检测两类主要的遗传损伤：基因突变（点突变）和染色体损伤（结构畸变、数目畸变）。单一试验无法检测出所有相关遗传毒性物质，通常进行一组试验，试验组合包括：细菌回复突变试验，体外哺乳动物染色体畸变试验，体外小鼠淋巴瘤TK试验，体外哺乳动物细胞微核试验。

如果按照以上进行遗传毒性试验且两个体外试验的结果均为阴性，则不需进行的动物体内遗传毒性试验。如果任意体外遗传毒性试验的结果为阳性，则应进行体内诱变性试验，否则推定为诱变物。应在体外试验确定出的Zui适宜终点的基础上选择相应的体内试验，通常采用的体内试验有：啮齿动物体内微核试验，啮齿动物骨髓中期分析，转基因基因突变试验。

本篇主要具体介绍细菌回复突变试验和体外哺乳动物染色体畸变试验两种体外试验。下篇会接着给大家介绍体外小鼠淋巴瘤TK试验和体内哺乳动物红细胞微核试验。

体外哺乳动物染色体畸变试验

 OECD473给出的体外哺乳动物染色体畸变试验，经修改适用于医疗器械。在有和没有代谢活化系统的情况下将细胞培养物暴露于受试样品中，按照预定的时间间隔，用中期分裂相阻断剂(如秋水仙碱)进行处理，收获、染色，并用显微镜分析中期分裂相细胞存在的染色体畸变。

细胞选择：仓鼠CHO、V79和CHL细胞系、其他哺乳动物的外周血淋巴细胞，培养温度为37℃。

样品准备：可溶解或悬浮在溶剂中的医疗器械或材料可直接用于测试，不溶于溶剂的医疗器械或材料可以使用浸提液作为受试样品。受试浸提液应在制备后的24小时内使用。如可能，浸提液应在制备后立用，以防止吸附在提取容器上或发生其他组分变化。

试验步骤：在首次实验中，应在有和没有代谢活化系统的情况下，用受试样品对增殖期的细胞进行染毒，淋巴细胞应在刺激有丝分裂后约48h开始染毒。细胞暴露于受试样品中3h-6h，并在染毒开始后约相当于1.5个正常细胞周期时采样。通常用秋水仙碱处理细胞培养物1h至3h，收获每个细胞培养物并单独处理以制备染色体，染色体制备包括细胞的低渗处理、固定和染色。

实验的单位是细胞，应评估具有染色体结构畸变的细胞百分比。应列出实验和对照培养物中不同类型的染色体结构畸变的数量和频率，记录主要畸变实验中同期测定的所有处理培养物和阴性对照培养物的细胞毒性，提供各个培养物的数据，所有数据都应以表格形式进行汇总。

体外染色体畸变试验的阳性结果表明，受试样品可诱发培养的哺乳动物体细胞发生染色体结构畸变。阴性结果表明，在本试验条件下，受试样品不会诱发培养的哺乳动物体细胞的染色体畸变。