USP 51化妆品FDA抗菌效果-防腐剂测试

化妆品USP 51抗菌效果测试：

USP <51> 用于测试防腐剂的有效性，数字“<51>”是指美国药典 (USP) 国家处方集通则第 51章。第 51 章详细描述了用于防腐剂功效测试的 USP 方法，有时称为“防腐剂挑战试验”。

注射剂、滴眼液和止咳糖浆等多剂量水性产品在配制时加入了防腐剂，以防止消费者可能带入的微生物造成腐败变质。消费者在制造后引入的微生物污染可能会导致更严重的疾病，充其量也会导致效力或产品功能的退化。

防腐剂被认为是一种活性药物成分，制剂中的“效力”或数量通常在产品发布前和稳定性研究期间通过 HPLC方法确认。通过化学方法确认防腐剂的量并不一定与该制剂的抗菌活性仍然有效相关。出于这个原因，USP <51>在配方和稳定性试验期间执行。

USP <51>抗菌有效性测试

1.USP <51> 分别挑战（接种）含有 5 种不同微生物的配方。每个 USP <51>测试使用三种细菌和两种真菌菌株。

2.测试微生物在液体或固体培养基中生长，具体取决于微生物。

3.用于USP 51测试的微生物如下：

a、白色念珠菌 （一种酵母……酵母是一种真菌）

b、巴西曲霉 黑曲霉 （一种丝状霉菌……也是一种真菌）

c、大肠杆菌 （更广为人知的名称是“大肠杆菌”）

d、铜绿假单胞菌 （在工业上非常成问题）

e、金黄色葡萄球菌 （更广为人知的名称是“葡萄球菌”）

4.测试微生物或者通过离心从肉汤培养物中收获，或者通过将表面生长物从固体培养基洗涤到无菌容器中来收获。

5.通过将收获的微生物重新悬浮在无菌盐水中以产生 ~1 X 10^8 CFU/ml 来标准化测试微生物的浓度。

6.执行回收率分析以验证样品中存在的微生物可以使用所选的稀释和平板方案充分回收和计数。

7.将足够体积的测试产品（通常为 10 毫升）分配到 5 个单独的容器中，每个容器都接种了单独的测试微生物（如上所述）。

8.测试产品中活微生物的初始浓度通过标准稀释法和平板计数法确定。

9.接种的测试产品在 22.5 ± 2.5°C 下孵育，并根据配方所属的产品类别，每隔 7、14 和/或 28天取样一次以确定微生物浓度。

10.将每个间隔的微生物浓度与初始浓度进行比较，根据 USP 指南确定防腐剂的有效性。

这些测试物种的新鲜培养物以接近 1,000,000 cfu/mL的初始水平引入到产品的各个等分试样中。受污染的产品每周进行一次测试，如果防腐剂合适，测试物种的数量将减少，如下所示。

USP<51>抗菌有效性测试的优势：

USP 51 抗菌效果测试指定了初始目标接种浓度，这允许对属于同一产品类别的产品进行相当可重复的比较。

USP 51方法用代表广泛的制造、医院和家庭污染物的各种微生物（包括革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌、酵母和霉菌）对防腐产品提出挑战。

初始接种浓度相对较高，表明如果在制造或售后过程中无意中被微生物污染，产品在“现实生活”中的表现如何。

测试主要依据：

欧盟EP英国BP 2013 endix XVI C，美国USP 51（USPGeneral Chapter51），欧盟化妆用品及香料协会指引COLIPA，化妆品及香料协会CTFA等。

USP51,EP7.0防腐挑战测试过程：防腐测试需进行霉菌菌种前培养，霉菌菌种前培养需要5天，再进行加菌测试，加菌后培养14天，再进行样品洗脱。