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3、检测步骤
注：加入微孔板中的样品须为无菌样品（使用试剂盒中提供的无菌水进行稀释）。
1） 取出所需数量的微孔条置于微孔架上，将剩余微孔板条 放回铝箔袋中密封，2-8℃储存。
2） 依次将 140μL 标准品或样品、140μL 检测菌液加入微孔中（用标准品或样品溶液润洗枪头），用粘胶薄膜盖好微孔条（揭开粘胶薄膜的保护层，用手或压舌板将粘胶 薄膜压平，使其充分封闭微孔板条）。注:保证粘胶薄膜和微孔的封闭性，特别注意微孔的边缘 部分。
3） 在 37℃培养箱中避光孵育 44-48 小时。
4） 轻轻来回颠倒混匀微孔板，使菌液充分混匀，用一 只手将微孔条固定于微孔架上，另一只手自右上方沿对角揭开粘胶薄膜，静置 2min待气泡全部消去（较难消去 的小气泡用移液枪吸出）后用酶标仪在 610-630nm 或540-550nm 下测量浑浊度。注：孵育完成后，微孔板可在冰箱中保存的Zui长时间为48h，用酶标仪读数。
注意事项
1） 试剂盒应在 2-8℃储存，产品过期后请勿使用。 2） 加入微孔板中的样品必须无菌，样品稀释时必须使用试剂盒中提供的无菌水。样品提取后必须在无菌的环境中进 行操作，且实验中需要的其他耗材也必须无菌。 3）检测培养基会刺激眼睛、皮肤和黏膜，应小心使用。 4） 试验完成后必须按照规章对微孔条进行处理（如高压灭 菌）。 5）为确定样品中是否存在抑制因素，应进行回收率测定。 提取之前，向样品中加入已知浓度的生物素溶液，回收率 应约为80-120%。当回收率较低时，表明存在抑制因素， 应增加样品稀释倍数以消除抑制因素的影响。
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