博莱霉素/热压敏染料绿色素快递邮寄出口DHL/UPS到乌兹别克斯坦
1)大肠杆菌筛选:25-50μg/mL(低盐LB培养基,NaCl浓度不能超过5g/L)
2)酵母菌筛选:50-300μg/mL(YPD或基本培养基)
3)哺乳动物细胞筛选:50-1000μg/mL(合适培养基,根据细胞系而不同)
一、细胞对Zeocin敏感性的确定(杀灭曲线建立)
重新铺板或者将满盘细胞重新分盘,使得细胞密度约25%,按照8个平板/组准备,培养24h,去除旧培养基。
加入含不同浓度Zeocin的筛选培养基,Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000μg/ml,每个浓度做3个平行;也可根据自身实验体系,设置不同的浓度梯度。
每3-4天更换新鲜的筛选培养基,并观察存活细胞的比例。选择在合适时间(1-2周内)杀死大多数细胞的浓度为Zui加工作浓度。【注】:若是难以在显微观察下区分活细胞,建议使用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量,以确定Zeocin的Zui适浓度。