消毒产品抑菌试验详解：载体抑菌试验和抑菌环试验

抑菌实验通常又称作抑菌圈实验、抗菌试验或药敏实验,一般是用于检测某种物质对于某种或多种细菌生长效力的抑制作用。消毒产品的原料配方不同，杀菌抑菌效果也会有不同。  

中科检测可开展消毒产品抑菌试验服务，出具的消毒产品抑菌试验报告具有CMA资质。  

载体抑菌试验  

适用消毒产品：适用于含溶出性抑菌成分的湿巾、无纺布口罩、卫生巾、护垫、尿布等固体类抑菌产品对微生物抑菌效果的测定。  

取试验菌24h新鲜斜面培养物用PBS洗下，用PBS稀释至约105CFU/mL～106CFU/mL，制成菌悬液备用。  

用灭菌剪刀在无菌条件下将试验样品和对照样品分别剪成20mm×30mm样片备用。试验时滴加0.1mL菌悬液。对照样片染菌前需经压力蒸汽灭菌。  

取无菌平皿，用无菌镊子取2片试验样片，勿重叠，置20℃±1℃水浴5min，在每一样片上滴加0.1mL试验用菌悬液，立即计时。  

待试验菌与样片接触作用至说明书的规定时间，分别夹取染菌样片加于5.0mLPBS试管中，混匀。振荡洗脱，分别吸取1.0mL样液，按活菌培养计数方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿。  

如平板上生长的菌落数较多时，可10倍系列稀释后，再进行活菌培养计数。用与试验样品同质材料不含抑菌成分的对照样片2片代替试验样片进行试验，作为阳性对照，阳性对照回收菌量为1.0×104CFU/片～9.0×104CFU/片；取同批次PBS、培养基作阴性对照。所有试验样本和对照样本均在36℃±1℃培养，细菌繁殖体培养48h、白色念珠菌培养72h观察终结果。试验重复3次，计算抑菌率。  

抑菌环试验  

适用消毒产品：含溶出性抑菌物质，可制成直径为5mm片状物的固体抑菌产品的抑菌效果鉴定；也可用于鉴别抗抑菌样品中是否含有可溶性抑菌物质。  

将试验菌24h新鲜斜面培养物用PBS洗下，稀释至5.0×105CFU/mL～5.0×106CFU/mL备用。  

抑菌片的制备：溶出性固体抑菌产品，直接制成直径为5mm，厚度不超过4mm圆片（块），每4片为一组。阴性对照样片的制备：取同种材质不含抑菌成分的样本，制成与试验组大小相同的圆片（块）。  

用无菌棉拭子蘸取浓度为5.0×105CFU/mL～5.0×106CFU/mL试验菌悬液，在适宜的培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60°，后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥5min。  

每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1片阴性对照样片，共5片。  

用无菌镊子取样片贴放于平板表面，阴性对照样片贴于平板中心位置，试验样片贴于四周，贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。各样片中心之间相距25mm以上，与平板的周缘相距15mm以上。  

盖好平板，置36℃±1℃培养16h～18h观察结果，试验重复3次。用游标卡尺测量抑菌环的直径（包括贴片）并记录，测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行，测量其直径应以抑菌环外沿为界。