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洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350uL,浸泡1min,洗板5次。
操作程序:
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。设置标准品孔、0值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标
准品50μL,0值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本50μL.
3、除空白孔外,标准品孔、0值孔和样本孔,加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
4、用封板膜盖住反应板,37C水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复5次。若使用自动洗板机,请按洗板
机操作程序进行洗板,添加浸泡30s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
6、将底物 A和 B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育15min。
7、所有孔加入终止液50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
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