基因扩增实验室(PCR实验室)的建设装修主要涉及实验室布局、功能区域划分、通风系统及压力控制、装修材料选择等多个方面。
一、实验室布局与功能区域划分
布局原则:
基因扩增实验室原则上应分为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域,并设有专用走廊。
各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的,有明显的标志,不能直通。如果紧密相连,需安装物品传递窗。
功能区域划分:
试剂准备区:主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。主要设备包括天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。
样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。本区的压力梯度要求为相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
扩增区:功能是DNA扩增和扩增片段的测定。对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。本区主要设备是核酸扩增热循环仪、加样器、超净台等。其中热循环仪的电源应专用,并配备稳压电源或UPS。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。本区的压力梯度要求为相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
二、通风系统及压力控制
通风系统:
四大区域应形成单向流线,宜采用全送全排的气流组织形式。各区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。
PCR实验室内通常有生物安全柜、通风柜等生产设备,这类设备排风量大且使用时间有间隔性,并不与空调系统运行时间一致,需特别注意设备启停时的压力控制,避免失压现象。
压力控制:
各区域之间的压力梯度需严格控制,确保气流从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。这有助于防止气溶胶污染和污染。
三、装修材料选择
墙面与地面:
实验室墙壁、顶板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑,通常使用PVC卷材或环氧树脂自流坪材料,这些材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
墙体内壁光洁、不积尘、耐腐蚀、易清洗消毒。地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
其他装修材料:
灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。实验室应设应急照明装置,考虑合适的安装位置,以保证人员安全离开实验室。
实验台(桌)柜和座椅等应稳固和坚固,边角应圆滑。实验台面应防水,并能耐受热、有机溶剂、酸碱、消毒剂及其他化学剂。一般采用环氧树脂台面。
四、其他注意事项
样品制备区空间:样品制备区空间应相对较大,以便放置生物安全柜和低温冰箱等设备。
紧急洗眼器:试剂准备区和样品制备区应设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全。
净化要求:PCR实验室没有严格的净化要求,但为避免交叉污染,宜采用适当的净化措施和气流组织形式。
基因扩增实验室的建设装修需求涉及多个方面,需要综合考虑实验室布局、功能区域划分、通风系统及压力控制、装修材料选择等因素,以确保实验室的安全、高效运行。