化妆品微生物检测基本流程介绍：微生物检测标准有哪些

化妆品微生物检测的重要性在于它能保障消费者健康，防止因使用含微生物超标的化妆品而引发过敏、感染等问题；符合法规要求，如《化妆品安全技术规范》规定的微生物控制指标，确保产品合法合规；还能提升产品质量，通过检测发现生产过程中的污染源，采取控制措施，确保化妆品稳定性和可用性；有助于增强市场竞争力，提供高质量、安全的产品，赢得消费者信任；预防微生物污染，避免化妆品变质、产生异味或引起皮肤刺激和感染；并且随着科技发展，快速检测技术如ATP生物荧光增幅法的应用，提高了检测效率，助力企业提质增效。

中科检测是专业的化妆品安全检测中心，经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作，可提供化妆品微生物检测、化妆品安全性评价、化妆品安全检测等化妆品安全相关服务。

化妆品微生物检验项目

菌落总数：

化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中性的需氧性和兼性厌氧菌落总数。

霉菌和酵母菌总数：

化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

3、耐热大肠菌群：—群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。

4、金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。

5、铜绿假单胞菌：属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。

还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，在特定条件下能生长。

化妆品微生物检验标准

《化妆品卫生规范》2007版中规定，眼部化妆品、口唇等黏膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品中，菌落总数要<500cfu/ml（g）其他化妆品菌落总数要<1000cfu/ml（g）；霉菌和酵母菌总数要<100cfu/ml（g）。

像粪大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等致病菌在1 g或1mL化妆品中是不得检出的。

《化妆品生产企业卫生规范》中规定：生产过程中半成品储存间、灌装间、清洁容器储存间和更衣室空气中细菌菌落总数应1000cfu/立方米；灌装间工作台表面细菌菌落总数应20 cfu/平方米，工人手表面细菌菌落总数应300cfu/只手，并不得检出致病菌。

化妆品微生物检验流程按照《化妆品安全技术规范》2015版第五章微生物检验方法对化妆品微生物进行检验工作。

微生物检验方法

总则

1范围本部分规定了化妆品微生物学检验的基本要求。本部分适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。

2仪器和设备

2.1天平：0~200g，至0.1g。

2.2高压灭菌器。

2.3振荡器。

2.4三角瓶：250mL、150mL。

2.5玻璃珠。

2.6玻璃棒。

2.7灭菌刻度吸管：10mL、1mL。

2.8恒温水浴箱。

2.9均质器或研钵。

2.10灭菌均质袋。

3培养基和试剂

3.1生理盐水成分：氯化钠8.5g蒸馏水加至1000mL制法：溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，121高压灭菌20min。

3.2 SCDLP液体培养基成分：酪蛋白胨17g大豆蛋白胨3g氯化钠5g磷酸氢二钾2.5g葡萄糖2.5g卵磷脂1g吐温807g蒸馏水1000mL制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加热溶解后，再与其他成分混合，加热溶解，调pH为7.2~7.3分装，每瓶90mL，121高压灭菌20min。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25左右使用。

注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。

3.3灭菌液体石蜡。制法：取液体石蜡50mL，121高压灭菌20min。

3.4灭菌吐温80。制法：取吐温8050mL，121高压灭菌20min。

4样品的采集及注意事项

4.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品规格大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应从不少于2个包装单位的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g 的样品，采样时可适当增加样品包装数量。

4.2供检样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。

4.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应置于室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。

4.4若只有一个样品而需做多种分析，如微生物、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做微生物检验，再将剩余样品做其他分析。

4.5在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。

5供检样品的制备

5.1液体样品

5.1.1水溶性的液体样品：用灭菌吸管吸取10mL 样品加到90mL 灭菌生理盐水中，混匀后，制成1：10检液。

5.1.2油性液体样品：取样品10g，先加5mL 灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80，在40~44水浴中振荡混合10min，加入灭菌的生理盐水75mL（在40~44水浴中预温），在40~44水浴中乳化，制成1：10的悬液。

5.2膏、霜、乳剂半固体状样品

5.2.1亲水性的样品：称取10g，加到装有玻璃珠及90mL灭菌生理盐水的三角瓶中，充分振荡混匀，静置15min。用其上清液作为1：10的检液。

5.2.2疏水性样品：称取10g，置于灭菌的研钵中，加10mL 灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加入10mL灭菌吐温80，研磨待溶解后，加70mL 灭菌生理盐水，在40~44水浴中充分混合，制成1：10检液。

5.3固体样品称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。使用均质器时，则采用灭菌均质袋，将上述水溶性膏、霜、粉剂等，称10g样品加入90mL 灭菌生理盐水，均质1min~2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g 样品，加10mL灭菌液体石蜡，10mL吐温80，70mL 灭菌生理盐水，均质3min~5min。